11ªAula teórica

16 Outubro 2017, 15:00 • Maria João Carlos da Silva Gama

Introdução aos métodos experimentais do estudo e definição dos elementos e factores de regulação dos genes.

Análise da estrutura da região promotora de um gene eucariótico. Pesquisa de potenciais sítios de ligação de factores de transcrição em bases de dados. (exemplo: TRANSFAC – The transcription factor database).

Estudo funcional dos elementos e factores de regulação da transcrição.

Ensaios dinâmicos de transfecção-transactivação:

Fundamento.

Definição do sistema experimental: Método de transfecção, célula hospedeira, vector de expressão contendo um gene reporter (CAT, b-Gal, luc), vector de expressão do factor de transcrição em estudo. Critérios de escolha.

(Profª Doutora Elsa Rodrigues)

4ª Aula prática

16 Outubro 2017, 10:30 • Maria João Carlos da Silva Gama

Análise de níveis de expressão de RNAs: ensaios de Northern blot. 

Fundamento teórico do método. Definição de padrão interno.

Bancos genómicos e bancos de cDNAs.

Resolução de exercícios.

4ª Aula prática

16 Outubro 2017, 09:00 • Maria João Carlos da Silva Gama

Análise de níveis de expressão de RNAs: ensaios de Northern blot. 

Fundamento teórico do método. Definição de padrão interno.

Bancos genómicos e bancos de cDNAs.

Resolução de exercícios.

10ª Aula teórica

13 Outubro 2017, 10:00 • Maria João Carlos da Silva Gama

Variação dos padrões de expressão genética e definição fenotípica.

(conclusão)

Tecnologia de DNA chips  (ou DNA micro-arrays).  

PCR em tempo real (qPCR). RT-PCR (Reverse-Transcription PCR) e qRT-PCR. Fundamento teórico do método.

Detecção dos produtos amplificados: compostos fluorescentes (SYBR green) e sondas específicas com marcação fluorescente: sondas Taqman e molecular beacons.

3ªAula prática

12 Outubro 2017, 15:30 • Maria João Carlos da Silva Gama

Clonagem molecular. Resolução de problemas.